生物實驗室怎么防止氣溶膠污染?
目前可確定的新冠肺炎傳播途徑主要為直接傳播、氣溶膠傳播、結婚粗傳播。那么生物實驗室如何防止氣溶膠污染?南寧銘力凈化工程為您詳解PCR實驗室的氣溶膠污染防范要點。
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PCR(聚合酶鏈式反應)技術的應用和發展使得疾病診斷得到更有效的證據,尤其是熒光定量PCR的推廣與應用,大大提高了檢測的靈敏性及準確性。然而隨著該項技術在病原檢測實驗室的廣泛應用,PCR實驗室的氣溶膠污染問題逐漸引起人們關注。為了有效地避免PCR實驗室DNA/RNA氣溶膠污染,獲得穩定、可靠的檢驗結果,防止出現假陽性,PCR實驗室要建立嚴格的防污染措施和相應的污染監測體系來防范氣溶膠污染污染,一旦發現氣溶膠污染,要及時查找原因,并相應解決污染問題。
一、實驗室氣溶膠污染及其來源
氣溶膠污染是指實驗室在長期運行中,PCR產物不斷積聚,附著在空氣中的顆粒中,并懸浮于氣體介質中形成的膠體分散體系,造成PCR檢驗的結果發生改變。
二、實驗室氣溶膠防范措施
1. 實驗室分區
PCR實驗室應該按照2002 年公布的《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》及《醫療機構臨床擴增實驗室管理辦法》 (衛辦醫政發〔2010〕194號)規定分為四區,分別是試劑準備區、標本制備區、PCR擴增區、產物分析區,前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區。擴增前區與擴增后區應嚴格分開,同時配備通風與凈化,形成科室之間的壓差。工作流程,包括實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區→標本處理區→擴增區→產物分析區,不得逆向流動。嚴禁在潔凈走廊反向,同時在各科室、相應緩沖間及潔凈走廊之間形成不同梯度的壓差,使空氣流動與工作方向相同。
工作流向及空氣流動方向
2. 設置對照
每次實驗前均準備兩個陰性對照(均以水作為模板,一個與樣品參與核酸提取,另一個不參與提取,僅在配置擴增體系時加入),以便對實驗室氣溶膠污染情況進行監測,判斷有無污染,是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。同時要設定一個陽性對照,用于監測實驗結果的可靠性和準確性。
3. 實驗室氣溶膠監測
采用家用空氣凈化器定期對實驗室空氣進行凈化,將凈化器中的過濾網浸入水中,混勻后,以混合后的水作為樣品進行相應檢測,以便及時了解空氣中氣溶膠的污染情況。定期采集移液槍、提取 儀、擴增儀等儀器內部及表面的棉拭子樣品進行檢測,以便了解實驗儀器中的污染情況。
4. 嚴格的工作流程
PCR各個科室分別配備各自的工作服,可以以顏色區分,進入各科室必須更換相應的工作服;同時在潔凈走廊入口配備PCR室專用鞋,進入必須更換,各科室前配備氈墊。潔凈走廊中實驗室人員只能從試劑準備區方向前往結果分析區方向,在條件允許的情況下各科室分別配備不同的人員進行操作,避免各科室人員互相竄動。
5. 加強清潔與消毒
做好實驗室的清潔及消毒工作是防止實驗室內發生氣溶膠污染的有效途徑。實驗室的清潔范圍包括工作臺面(試驗臺、超凈臺和存儲柜等)、儀器設備表面(離心機的轉頭、提取DNA用的加熱塊、擴增儀的樣品槽、移液器桿的吸孔、遺傳分析儀的加樣槽等)、重復使用的工具或器皿等的清潔。
實驗開始前后,先用新鮮配制的10%的次氯酸鈉溶液將上述區域及儀器的表面反復擦拭,再用75%乙醇擦洗以去除殘留物,待酒精揮發后方可進行試驗。這樣可以有效清除它們表面附著的各種污染物。同時定期對實驗室進行紫外燈照射消毒。
6. 提高實驗室人員規范操作意識
定期組織實驗室人員進行防污染安全培訓,宣講PCR實驗室操作規范,印發并講解《醫療機構臨床擴增實驗室管理辦法》(衛辦醫政發〔2010〕194號)、《關于做好血站核酸檢測工作的通知》(國衛辦醫發〔2015〕11號)、《血站核酸檢測實驗室質量保證指南》、 《法庭科學DNA實驗室規范》(GA/T382-2002)、《法庭科學DNA實驗室檢驗規范》(GA/T383-2002)等文件。
實驗室氣溶膠污染是現階段實驗室運行中最重要的防范方向,除了上述防范措施之外,實驗室要定期進行去除核酸的操作,同時將質量為先,數量次之,否則一旦出現氣溶膠污染,實驗室將無法繼續運行。氣溶膠污染的結果會影響實驗室檢測結果的質量,降低檢測結果的使用價值,嚴重時會造成疾病判斷的誤判或錯判,不能及時處理臨床疾病,導致嚴重經濟損失。實驗室一旦發現有氣溶膠污染的存在,必須認真查找污染源,分析造成的原因,并針對原因提出相應的解決方案,同時還要對這一時期獲得的檢測數據進行復核,查找是否存在未被發現的污染情況
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